உயிரியல் முறைக்கட்டுப்பாடு :: பேரளவு உற்பத்தி செய்தல் |
நச்சுயிரியை பெருமளவில் உற்பத்தி செய்தல் |
ஹெலிக்கோவெர்பா ஆர்மிஜெரா விலிருந்து NPV - பேரளவு உற்பத்தி |
- ஹெலிக்கோவெர்பா புழுவின் 5 – ம் இடைப் பருவநிலை NPV தயாரிக்கப் பயன்படுகிறது.
- 1x105 POB வைரஸ் கொண்ட 10 மிலி கலவையை, கண்ணாடி குப்பியில்உள்ள உணவில்மேற்பரப்பில் பரப்பவும்.
- வளைந்த முனை கொண்ட பளபளப்பான கண்ணாடி கம்பி (6 மிமி) கொண்ட வைரஸ் கலவையை பரப்பவும்.
- புழுவை, வைரஸ் பரப்பப்பட்ட கண்ணாடிகுப்பிக்குஎடை இடமாற்றம் செய்து, பஞ்சு வைத்து அடைக்கவும். பின் ℃ வெப்பநிலையில் வைக்கவும்.
- 5-ம் நாட்களுக்குப் பின்இறந்த புழுக்களை தனி குப்பியில் சேகரிக்கவும்.
- 200 இறந்த புழுக்களை, 300 மிலி கிருமி நீக்கப்பட்ட குப்பியில் வைத்து, பின் உறைகலனில் வைக்கவும்.
NPV – யை பதப்படுத்துதல்
- இறந்த புழுக்களை, அறை வெப்பநிலைக்கு மாற்றவும்.
- இறந்த புழுக்களை, குளிர்ந்த வடிநீரில் 1:2.5 (w/v) என்ற விகிதத்தில் கல்வமும் குழவியில் வைத்து வேதியல் திரள் நீக்கம் செய்யவும்.
- வேதியல் திரள் நீக்கம் செய்தவற்றை இரட்டை அடுக்குமெல்லிய துணியில் ஊற்றி வடிநீர் கொண்டு திரும்ப திரும்ப வடிகட்டவும்.
- தண்ணீர் மற்றும் இறந்த புழுக்களின் எடை விகிதம் 1: 7.5 – 12.5 (W/V) ஆகும்.
- மெல்லிய துணியில் வடிகட்டி எஞ்சியவற்ற அகற்றவும் மற்றும் முழுமையாக வடிகட்டாத வற்றை மீண்டும் மைய விலக்கல் 500 rpm, 30 – 60 நொடிக்கு செய்யவும்.
- மேலும் மேற்பரப்பில் மிதக்கிறவற்றை 5000 rpm ற்கு 20 நிமிடத்திற்கு மைய விலகல் செய்யவும்.
- பின்னர் பாலிஹெட்ரல் அக்லூசன் பாடீஸ் (POB) கொண்ட உருண்டையை கிருமி நீக்கப்பட்ட வடிநீரில் மிதக்கவிடவும். பின் உருண்டையை குறைந்த rpm – ல் இருந்து அதிக rpm – ற்கு மைய விலக்கல் செய்யவும்.
- இறுதியாக உருண்டையை வடிநீரில் சேகரிக்கவும்.
|
|
|